Il est le fils de Thomas Knight. Il étudie au Balliol College d’Oxford. Il se marie avec Frances Felton en 1791. Il reçoit la médaille Copley en 1806. La médaille Knight est instituée en son honneur. Il est membre de la Royal Society en 1805.

Il est notamment l’auteur de A Treatise on the Culture of the Apple and Pear, On the Manufacture of Cider and Perry (1797), Pomona Herfordiensis (1811) ainsi que de nombreux articles qui lui valent la Médaille Copley en 1806.

Knight est à l’origine de nombreuses variétés de fruits et s’intéresse notamment au géotropisme.